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三維細胞培養系統培養基的幾點要求

更新時間:2017-07-31瀏覽:2602次
  現代生物技術均通過細胞作為載體來進行,無論是基因治療、干細胞、克隆技術都在細胞內進行的。三維細胞培養系統培養細胞生長需要一定的營養環境,用于維持細胞生長的營養基質稱為培養基,即指所有用于各種目的的體外培養、保存細胞用的物質,就其本意上講為人工模擬體內生長的營養環境,使細胞在此環境中有生長和繁殖的能力。細胞培養基其組成成分主要有:水、氨基酸、維生素、碳水化合物、無機離子及其他一些入核酸降解物、激素等。
  三維細胞培養系統細胞培養基的基本要求:
  一、營養成分;維持細胞生長的營養條件一般包括以下幾個方面:
  1.氨基酸:細胞合成蛋白質的原料。體外培養的各種培養基內都含有必需氨基酸。
  2.單糖:培養中的細胞可以進行有氧與無氧酵解,六碳糖是主要能源。此外六碳糖也是合成某些氨基酸、脂肪、核酸的原料。細胞對葡萄糖的吸收能力高,半乳糖低。
  3.維生素:主要扮演輔酶、輔基的角色,*。生物素、葉酸、煙酰胺、泛酸、吡哆醇、核黃素、硫胺素、維生素B12都是培養基常有的成分。
  4.無機離子與微量元素:細胞生長除需要鈉、鉀、鈣、鎂、氮和磷等基本元素,還需要微量元素,如鐵、鋅、硒、銅、錳、鉬、釩等。
  二、促生長因子及激素。各種激素、生長因子對于維持細胞的功能、保持細胞的狀態(分化或未分化)具有十分重要的作用。
  三、滲透壓。細胞必須生活在等滲環境中,大多數培養細胞對滲透壓有一定耐受性。
  四、無毒、無污染。體外生長的細胞對微生物及一些有害有毒物質沒有抵抗能力,因此培養基應達到無化學物質污染、無微生物污染、無其他對細胞產生損傷作用的生物活性物質污染。
  五、pH。氣體也是細胞生存的必需條件之一,所需氣體豐要是氧和二氧化碳。氧參與三羧酸循環,產生能量供給細胞生長、增殖和合成各種成分。一些細胞在缺氧情況下,借糖酵解也可獲取能量,但多數細胞缺氧不能生存。在開放培養時,一般置細胞于95%空氣加5%二氧化碳的混合氣體環境中培養。二氧化碳既是細胞代謝產物,也是細胞所需成分,它主要與維持培養基的pH有直接關系。
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